青蒿素的結(jié)構(gòu)測(cè)定

1973?年初，北京中藥所開(kāi)始著手對(duì)青蒿素Ⅱ進(jìn)行結(jié)構(gòu)測(cè)定，由于他們的化學(xué)研究力量和儀器設(shè)備薄弱，結(jié)果不太理想。他們了解到中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所（以下簡(jiǎn)稱“有機(jī)所”）的劉鑄晉對(duì)萜類化合物的研究有較多經(jīng)驗(yàn)，于是派人與有機(jī)所聯(lián)系，希望協(xié)作進(jìn)行“青蒿素Ⅱ”的結(jié)構(gòu)測(cè)定。為此，屠呦呦于1973?年?8?月下旬?dāng)y帶有關(guān)資料到有機(jī)所聯(lián)系青蒿素結(jié)構(gòu)測(cè)定事宜。劉鑄晉因有其他工作而將青蒿素結(jié)構(gòu)測(cè)定工作交由周維善組。自?1974?年?2?月到?1976?年間，北京中藥所先后派出倪慕云、鐘裕蓉、樊菊芬和劉靜明到有機(jī)所參與結(jié)構(gòu)測(cè)定工作。她們?cè)谏虾Ｗ鰧?shí)驗(yàn)的同時(shí)及時(shí)將進(jìn)展告訴在北京的屠呦呦等，屠呦呦等通過(guò)向林啟壽、梁曉天等請(qǐng)教、溝通，再將意見(jiàn)匯總反饋給上海的工作人員，為上海進(jìn)行的結(jié)構(gòu)測(cè)定工作提供參考。

屠呦呦等于?1975?年與中國(guó)科學(xué)院生物物理研究所（以下簡(jiǎn)稱“生物物理所”）取得聯(lián)系并開(kāi)展協(xié)作，用當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)先進(jìn)的?X?衍射方法測(cè)定青蒿素的化學(xué)結(jié)構(gòu)。完整、確切的青蒿素結(jié)構(gòu)最后是由生物物理所的李鵬飛、梁麗等在化學(xué)結(jié)構(gòu)推斷的基礎(chǔ)上，利用生物物理所的四圓?X?射線衍射儀，測(cè)得了一組青蒿素晶體的衍射強(qiáng)度數(shù)據(jù)。研究人員采用一種基于概率關(guān)系而從衍射強(qiáng)度數(shù)據(jù)中獲取相位數(shù)據(jù)的數(shù)學(xué)方法，利用北京計(jì)算中心計(jì)算機(jī)進(jìn)行計(jì)算，在?1975?年底至?1976?年初得到了青蒿素的晶體結(jié)構(gòu)；后經(jīng)梁麗等在精細(xì)地測(cè)定反射強(qiáng)度數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，確立了青蒿素的絕對(duì)構(gòu)型。

青蒿素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與當(dāng)時(shí)已知的抗瘧藥結(jié)構(gòu)完全不同，它是一個(gè)含有過(guò)氧基團(tuán)的倍半萜內(nèi)酯。分子中有?7?個(gè)手性中心，包含有?1，2，4－三噁烷的結(jié)構(gòu)單元以及特殊的碳、氧原子相間的鏈。

全國(guó)范圍內(nèi)的青蒿素臨床驗(yàn)證及其他工作

1973?年上半年，為爭(zhēng)取當(dāng)年秋季進(jìn)行臨床驗(yàn)證，北京中藥所在提取設(shè)備不夠完善的情況下，向研究團(tuán)隊(duì)增派蒙光榮、譚洪根等人，并從中醫(yī)研究院臨時(shí)借調(diào)數(shù)名進(jìn)修人員進(jìn)行提取。研究人員帶上所里分離獲得的青蒿素Ⅱ100?多克，于當(dāng)年?9?月赴海南開(kāi)展臨床驗(yàn)證，一共做了?8?例臨床，其中惡性瘧?5?例、間日瘧?3?例。結(jié)果顯示，青蒿素對(duì)間日瘧有效，但是未能證明對(duì)惡性瘧的效果。

山東省黃花蒿協(xié)作組?1974?年?5?月中上旬在山東巨野縣城關(guān)東公社朱莊大隊(duì)用黃花蒿素對(duì)?10?例間日瘧患者進(jìn)行臨床觀察，效果很好。

1974?年?9?月8日，云南臨床協(xié)作組的陸偉東、王學(xué)忠?guī)еS蒿素到云縣、茶坊一帶進(jìn)行臨床效果觀察。10?月13日他們?cè)诠ⅠR碰到廣東中醫(yī)學(xué)院的李國(guó)橋率醫(yī)療隊(duì)在耿馬開(kāi)展腦型瘧的救治以及“7351”的臨床驗(yàn)證等工作。經(jīng)北京和云南地區(qū)“523?辦公室”領(lǐng)導(dǎo)的同意，陸偉東提供藥給李國(guó)橋小組一起進(jìn)行臨床驗(yàn)證?。云南小組的成員于?11?月5日返昆明。到當(dāng)年年底，廣東醫(yī)療隊(duì)共驗(yàn)證了18?例，其中惡性瘧?14?例（包括孕婦腦型瘧?1?例、黃疸型瘧疾?2?例）、間日瘧?4?例。匯集之前云南協(xié)作組驗(yàn)證的?3?例患者，云南提取的黃蒿素首次共驗(yàn)證了?21?例病人，其中間日瘧?6?例、惡性瘧?15?例，全部有效。所以，此次試驗(yàn)明確了黃蒿素對(duì)惡性瘧疾的效果。

1975?年?2月底，在北京召開(kāi)各地區(qū)“523?辦公室”和部分承擔(dān)任務(wù)單位負(fù)責(zé)人會(huì)議。廣東地區(qū)“523?辦公室”把廣州中醫(yī)學(xué)院在云南耿馬臨床試驗(yàn)的《黃蒿素治療瘧疾?18?例小結(jié)》在會(huì)議上進(jìn)行了匯報(bào)。鑒于1972?年以來(lái)青（黃花）蒿實(shí)驗(yàn)研究的情況，尤其是黃蒿素在云南治療惡性瘧取得的良好療效，青（黃花）蒿素被列入1975?年“523?任務(wù)”的研究重點(diǎn)。會(huì)議之前，衛(wèi)生部時(shí)任負(fù)責(zé)人劉湘萍聽(tīng)取匯報(bào)，對(duì)北京中藥所的工作因青蒿研究挫折又一次準(zhǔn)備下馬提出了批評(píng)?。北京中藥所?1973?年下半年到?1974?年下半年在提取青蒿素工作方面遭遇較大的挫折。1975?年?4?月，在成都召開(kāi)了“523?任務(wù)”中醫(yī)中藥專業(yè)座談會(huì)。由于前一年李國(guó)橋等用黃蒿素治療惡性瘧取得了良好效果，制定了當(dāng)年的研究計(jì)劃，開(kāi)始進(jìn)行全國(guó)大會(huì)戰(zhàn)擴(kuò)大臨床驗(yàn)證，參加青蒿及青蒿素研究的單位和人員大量增加。為了統(tǒng)一臨床診斷及驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)，在下現(xiàn)場(chǎng)之前，“523?辦公室”在海南組織李國(guó)橋等專家對(duì)參與臨床驗(yàn)證的工作人員進(jìn)行了瘧原蟲(chóng)觀察方法、體溫測(cè)定時(shí)間等相關(guān)知識(shí)的培訓(xùn)。截至?1978?年?11月青蒿素（包括黃花蒿素、黃蒿素）治療瘧疾科研成果鑒定會(huì)時(shí)，參與青蒿及青蒿素研究和協(xié)作的單位有?45?家之多。這些單位用青蒿粗制劑、青蒿素共進(jìn)行了?6?555?例的臨床驗(yàn)證，用青蒿素制劑治療的有?2?099?例，其中惡性瘧?588?例（含腦型瘧?141?例）、間日瘧?1?511?例。

各研究單位在青蒿素的藥理、毒理等方面也做了大量的工作，還開(kāi)展了青蒿素的含量測(cè)定研究。1977年?2?月，“全國(guó)?523?辦公室”在山東省中醫(yī)藥研究所舉辦第一次青蒿素含量測(cè)定技術(shù)交流學(xué)習(xí)班。參加學(xué)習(xí)班的除北京中藥所、山東省中醫(yī)藥研究所和云南省藥物研究所外，還有上海、廣東、廣西、江蘇、河南、四川、湖北等省、直轄市、自治區(qū)有關(guān)的藥物研究所、制藥廠等?15?個(gè)單位的專業(yè)人員。同年?9?月，在北京中藥所舉辦第二次青蒿素含量測(cè)定技術(shù)交流學(xué)習(xí)班，邀請(qǐng)了衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所的嚴(yán)克東指導(dǎo)，以南京藥學(xué)院和廣州中醫(yī)學(xué)院建立的紫外分光度法為基礎(chǔ)，經(jīng)過(guò)集體討論改進(jìn)了操作方法，并在不同的儀器上比較其測(cè)定誤差以后，一致認(rèn)為這個(gè)方法的特異性、精密度和準(zhǔn)確度都符合青蒿素原料藥和制劑的測(cè)定要求，也便于基層藥檢部門(mén)執(zhí)行。最后由廣州中醫(yī)學(xué)院沈璇坤、衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所嚴(yán)克東、云南省藥物研究所羅澤淵、山東省中醫(yī)藥研究所田櫻、北京中藥所曾美怡共同完成的《紫外分光光度法測(cè)定青蒿素含量》文稿于?1983?年公開(kāi)發(fā)表。青蒿素質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)則是以北京中藥所曾美怡起草的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為主，參考云南和山東兩單位起草的內(nèi)容，共同整理制訂出全國(guó)統(tǒng)一的青蒿素質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

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